本期为您推荐上海交通大学徐岷涓研究员研究团队发表在知名期刊《微生物学通报》上的一篇文章:抗性基因报告系统辅助选育厦门霉素 A 高产菌株。
文章摘要内容如下:
厦门霉素 A 是厦门链霉菌(Streptomyces xiamenensis)318 菌株的主要次级代谢产物,具有显著的抗纤维化活性及药用潜力。但野生型菌株中厦门霉素 A 的产量仅有 14 mg/L,其生产水平亟待提升。常压室温等离子体(atmospheric and room temperature plasma,ARTP)诱变作为一种新型的育种手段,通过在室温范围内产生均匀等离子体射流作用于菌液,启动细胞紧急修复机制,诱使菌株发生随机突变,是一种安全、快速、操作灵活的诱变育种手段,已广泛应用于多种微生物代谢产物的产量提升。
本研究通过随机诱变-抗性标记筛选获得高产菌株并进行培养基优化提高厦门霉素 A 的产量。在厦门霉素 A 的生物合成基因簇后融合一个抗性基因,用于报告整个基因簇的表达水平。构建了携带卡那霉素抗性标记的产生厦门霉素 A 的工程菌 MT-XN 作为出发菌株。对该菌株进行一轮 ARTP 诱变,使用 90 mg/L 卡那霉素筛选,得到了厦门霉素 A 产量为 101.7 mg/L 的突变菌株 MA-8。进一步通过响应面法优化培养基配方,在最佳培养基中 MA-8 菌株产生的厦门霉素 A 达到 134.2 mg/L,较野生型菌株提高了 845.1%。采用随机诱变-报告基因筛选系统,可快速发现厦门霉素 A 产量大幅提升的高产菌株,为后续的药物开发奠定良好的基础。
文章精彩内容如下: