本期为您推荐江苏澳创生物科技有限公司王健教授研究团队发表在知名期刊《食品与发酵工业》上的一篇文章:常压室温等离子诱变选育L⁃色氨酸高产菌株。
文章摘要内容如下:
L⁃色氨酸是人和动物体内的一种必需氨基酸,是构成蛋白的重要组成部分,但人和动物自身不能合成L⁃色氨酸,必须从外界摄取。目前L-色氨酸的生产方法以微生物发酵法为主,相比传统的化学合成法和蛋白质水解法,微生物发酵法具有更低的生产成本、更加绿色环保、更易于大规模生产等显著的优越性。微生物发酵法生产L-色氨酸的过程中,微生物菌种的优劣决定着发酵生产过程中的生产工艺、生产成本甚至产品质量,因此,选育高产色氨酸优良菌株具有重要意义。常压室温等离子体(atmospheric and room temperature plas-ma,ARTP)诱变技术最近几年在科研及工业领域逐步得到应用,尤其在微生物突变育种中取得了良好的效果。与其他诱变育种技术相比,ARTP 诱变育种技术能够更有效造成 DNA 的突变,并且设备操作简单快捷,对环境条件要求较低,操作过程中安全性较高,在高效进化育种领域具有较大的应用潜力。
本研究中,为了提升发酵法产L-色氨酸的生产效率,使用常压室温等离子诱变育种技术,并结合结构类似物抗性定向筛选的方法,选育高产色氨酸菌株。将出发菌 Escherichia coli AC-1042 经过ARTP诱变处理后,在抗性培养基平板上筛选具有5-甲基色氨酸、对氟苯丙氨酸抗性的突变菌株,选取产酸高、遗传稳定的菌株重复进行ARTP诱变处理和抗性筛选,不断提高菌株对结构类似物的抗性水平。经过多次ARTP诱变处理和抗性筛选,获得1株色氨酸高产菌株ACTRP104,经过30L发酵罐培养44h后L-色氨酸质量浓度可以达到61.65g/L,葡萄糖转化率达到20.64%,比出发菌分别提高了20.69%和17.81%。结果表明,ARTP诱变和结构类似物抗性筛选相结合,可以有效地获得色氨酸高产突变菌株,大大提高色氨酸的发酵生产技术水平,获得的色氨酸高产菌株ACTRP104具有较好的工业化应用前景。
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