本期为您推荐北京林业大学林学院李素艳研究团队发表在《微生物学通报》上的一篇文章：一株分离自绿化废弃物堆肥枯草芽孢杆菌的常压室温等离子诱变及其发酵条件。

文章摘要内容如下：

随着城市的建设，园林绿化也得到了快速发展，中国每年有1400万吨多的绿化废弃物。目前广泛采用的绿化废弃物处理方法是好氧堆肥，但由于绿化废弃物含有较高的木质素和纤维素，在一定程度上制约着堆肥的发酵周期，可以通过接种微生物菌种提高堆肥效率。

为了提高堆肥降解有机废弃物的效率，本实验室以羧甲基纤维素钠(CMC-Na)为底物，从绿化废弃物堆肥中筛选得到枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis,B.subtilis)BL03，它具有较好的纤维素分解能力，能提高绿化废弃物堆肥中纤维素降解和腐殖质合成的速度。为进一步提高B.subtilis BL03的纤维素酶生产能力。利用常压室温等离子(atmospheric and room temperature plasma,ARTP)诱变BL03菌，通过CMC-刚果红固体培养基观察水解透明圈和液体发酵后检测酶活力的方法，进行3轮筛选；通过连续多代培养，观察突变株的遗传稳定性；通过梯度温度、pH 培养，研究突变株发酵的最适生长温度、培养基初始pH；利用正交设计方法，研究适合突变株发酵培养的工业级原料配方。筛选到2株正突变株，酶活力分别提高了69%和72%；连续10代培养稳定，验证了突变株的遗传稳定性；其中酶活力最高的突变株 BLA3890最适培养温度为37 ℃、培养基初始pH为5.0-6.5，并研究得到较经济的发酵培养基配方。

诱变获得高性能的菌种是研究中常用的一种育种方法，常用的方法有物理诱变、化学诱变等，如：空间诱变、紫外线诱变、亚硝基胍诱变等，但这些方法存在费用昂贵或环境保护、职业健康等方面的负面影响。ARTP 诱变技术是近年发展起来的诱变技术，具有操作方便、突变率高、环境友好等特点。本研究采用ARTP 诱变 B.subtilis BL03 后得到的突变株 BLA1973和BLA3890 在绿化废弃物堆肥或其他纤维素降解行业具有进一步研究和应用的价值。

文章精彩内容如下：

图2 菌株在 CMC-刚果红培养基上的透明圈

表1 两轮复筛获得的突变株在刚果红培养基上的透明圈直径和CMC酶活力

图6 不同培养基单因素水平试验(n=3)